持续未消的疫情阴霾，笼罩在每位国人心中。疫情形势严峻，如何精准识别患者显得至关重要，成为人们关注的焦点。2月7日下午一则关于新冠肺炎患者三次咽拭子样本检测均为阴性，通过下呼吸道样本最终确诊的新闻迅速传播开来。

目前官方推荐的针对新型冠状病毒肺炎（novel coronavirus pneumonia, NCP，以下简称“新冠肺炎”）的两项诊断依据是病毒的核酸检测和基因测序，只要符合核酸检测阳性，或基因测序与已知的新冠肺炎病毒高度同源任意一条，就可以确诊。其中核酸检测是最终诊断新冠肺炎的金标准。

1.什么是核酸检测？

常用聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）来进行新型冠状病毒的核酸检测，PCR可以实现遗传物质的快速扩增，并且能够区分DNA序列和RNA序列，常应用于癌症、感染与遗传疾病的诊断与研究等领域。

目前较为常见的采样方法是采集鼻咽拭子，其他采集方法还有采集痰液或肺泡灌洗液。

在临床实验室检测过程中，如果能在患者样本中检测到新型冠状病毒的特异核酸序列，应提示该患者可能被新型冠状病毒感染。

但有些患者可能存在假阴性的结果。核酸检测出现假阴性的结果与诸多因素有关。

2.核酸检测为什么会出现假阴性的结果？

患者症状轻重不一

有些患者在发病的早期阶段症状不明显，上呼吸道鼻咽部的病毒量可能很少，因此可能会出现检测不出的情况，从而出现假阴性的结果。且目前对新型冠状病毒的病程转归并不完全清楚，采样的最佳时机仍不确认。尤其是该病潜伏期长，绝大多数患者就诊时可能已经迁延了数天至数周，是否是鼻、咽拭子检测的最佳时期，样本内病毒载量是否仍然在方法学的检测范围内还有待确定。

采样具有差异性

采样部位的准确性与操作者个人有一定的关系，若采样人员操作不准确或不规范，也可能导致采样出现误差。

试剂盒质量参差不齐

面对疫情爆发的严峻形势，目前核酸试剂盒研发的时间短，产品稳定性不高。在现阶段的特殊时期，这些试剂在临床应用之前无法保证必要的方法学验证，也很难排除大规模人群中存在个别样本由于扩增区突变导致假阴性的可能。此外生产厂家不同，生产的核酸检测试剂盒的质量参差不齐，也会影响到检测结果。

标本运输的限制

RNA病毒的核酸由于自降解和生物酶介导的降解，是最难以稳定保存的生物分子之一。样本保存情况直接影响检测结果，含有RNA病毒的样本建议存放于专用的病毒保存液中，且在冷藏状态下尽快运输送检。新型冠状病毒作为一种新发现的RNA病毒，其储存、运输的要求可能更高。然而目前绝大多数医院在样本采集后需要送至疾控中心统一检测，从采样到实际开展检测可能经过长时间的等待，采样医院以及开展检测的实验室是否具备专业的样本保存和低温运输能力，均是保证新型冠状病毒准确检测的重要因素。

3.面对严重的疫情，如何提高新冠肺炎的确诊率？

规范流程

核酸检测是一个连贯的受控过程，从采样→保存送样→病毒灭活→裂解核酸提取→检测，必须保证每个环节的操作规范，否则无法提取出足够、有效的病毒核酸。因此必须严格规范操作，提高检测结果的准确性。

多点采样，反复检测

对疑似患者进行鼻咽拭子、痰液和肺泡灌洗液等多点采样，或对同一部位反复进行核酸检测，并结合临床症状以保证诊断的准确性。

CT检查与核酸检测相结合

目前核酸检测具有特异性高、灵敏度低的特点，造成假阴性率的可能性升高。即使疑似病患的核酸检测呈阴性，也不能排除感染新冠肺炎的可能性。

鉴于目前武汉及其周边地区的严峻形势，将CT检测作为排查疑似患者的主要标准，及时对疑似患者进行收治，将会大大减少交叉感染的风险，提高新冠肺炎的诊断率。